دانلود پایان نامه جهت دریافت درجه کارشناسی ارشد اصلاح نباتات در رشته کشاورزی
با عنوان:بررسی جنینزایی سوماتیکی در نخل خرما -Phoenix dactylifera L.-
دانشکده مهندسی کشاورزی
گروه زراعت و اصلاح نباتات
پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی
عنوان
بررسی جنینزایی سوماتیکی در نخل خرما –Phoenix dactylifera L.–
1393
تکه هایی از متن به عنوان نمونه :
عنوان صفحه
فصل دوم مروری بر پیشینه موضوع 5
2-2 گسترش جغرافیایی نخل خرما در جهان 7
3-2 وضعیت تولید نخل خرما در جهان و ایران 9
3-5-2 تکثیر از طریق کشت بافت 13
6-2 عوامل مؤثر بر رشد و نمو ریزنمونه 13
3-1-6-2 کربوهیداتها ( منبع کربن و انرژی) 16
6-1-6-2 هورمونها و تنظیمکنندهای رشد 19
1-2-7-2 تولید گیاهان هاپلوئید مضاعف 28
4-7-2 کشت ریز نمونه گل آذین 33
1-3 زمان و محل انجام آزمایش 39
1-2-3 تهیه ترکیبات مختلف، محلولهای پایه و محیطهای کشت 39
2-2-3 ابزار و وسایل مورد نیاز برای تهیه و نگهداری محیط کشت: 40
5-5-3 آزمایش پنجم: بررسی تأثیر غلظت ساکارز بر کشت بساک خرما 47
6-5-3 آزمایش ششم: بررسی تأثیر غلظتهای مختلف کلشیسین بر روی کشت بساک خرما 48
7-5-3 آزمایش هفتم: کشت میکروسپور 48
5-4 آزمایش پنجم: بررسی میزان غلظت ساکارز بر کشت بساک خرما 61
6-4 آزمایش ششم: بررسی تأثیر غلظتهای مختلف کلشیسین بر روی کشت بساک 61
7-4 آزمایش هفتم: کشت میکروسپور 63
فصل پنجم نتیجه گیری کلی و پیشنهادات 69
فهرست جداول
عنوان صفحه
جدول 1-3 ترکیبات تنظیمکنندههای رشد در محیط کشت در آزمایشات اول، سوم، چهارم و هشتم 43
جدول 2-3 ترکیبات اکسینهای مختلف در محیط کشت در آزمایشات دوم و نهم 44
جدول 2-4 تأثیر غلظت اکسینهای مختلف بر جنینزایی سوماتیکی از ریزنمونه برگ رقم استعمران 56
جدول3-4 تجزیه واریانس تأثیر کلشیسین و مدت زمان بر روی کالوس زایی در کشت بساک خرما ……….. 62
جدول 4-4 تجزیه واریانس تأثیر تیمار تنظیمکنندهی رشد بر کالوسزایی میوه نارس نخل خرما. 64
جدول 5-4 تجزیه واریانس تأثیر تیمارهای تنظیمکنندهی رشد برکالوسزایی آندوسپرم نخل خرما 67
فهرست تصاویر
عنوان صفحه
تصویر 1-2 گل آذین ماده و نر نخل خرما 10
تصویر 2-2 نمای شماتیک درخت و میوهی نخل خرما 11
تصویر 1-3 تهیه برگ از پاجوش، برش برگها با طول 1-2 سانتی متر، کشت ریزنمونه در محیط کشت 43
تصویر 2-3 برش برگها، قرار دادن برگها در آنتی اکسیدانت، برش ابتدایی و انتهایی برگها 45
تصویر 5-3 خوشهچههای نر خرما، بساک گل نر، قرار دادن بساکها در محیط کشت 48
تصویر 6-3 تصویر مش، رسوب میکروسپورها در محیط کشت ایزولاسیون، تصویر لام هموسایترمری 49
تصویر 8-3 میوه نخل خرما، آندوسپرم جدا شده از پریکارپ، کشت آندوسپرم به همراه جنین و پریکارپ 51
تصویر 3- 4 نقاط سفید رنگ بر روی بساک، اندامزایی بر روی بساک، تولید کالوس در انتهای بساکها 59
تصویر 5 -4 کالوس تولید شده از بساک، جنین تولید شده از بساک. 63
فهرست نمودارها
عنوان صفحه
فهرست پیوستها
عنوان صفحه
پیوست 1 ترکیب محیط کشت پایه MS و محلولهای ذخیرهای آن 94
پیوست 2 ترکیب محیط کشت پایه Y3 مایع و محلولهای ذخیره آن 95
فصل اول
مقدمه و اهداف
فصل اول مقدمه و اهداف
1-1 مقدمه
نخل خرما[1] (Phoenix dactylifera L.) گیاهی دیپلوئید (2n = 36)، چند ساله[2]، تکلپه[3]، دوپایه[4]، دگرگشن[5] و همیشه سبز[6] بلند است که متعلق به خانواده آراکاسه[7] میباشد (اسلام و همکاران[8]، 2011). این خانواده ۲۰۰ جنس و 2۵۰۰ گونه دارد (فاو[9]، 2008). نخل خرما به دلیل سازگاری و تحمل طبیعی بالا با شرایط نامساعد محیطی از قبیل خشکی، شوری و درجه حرارت بالا نقش اقتصادی و اجتماعی مهمی در مناطق بیابانی خاورمیانه و شمال آفریقا را داراست (باکیت و همکاران[10]، 2008). به طوری که تقریباً 95 درصد از خرمای تولیدی کل جهان در خاورمیانه تولید میشود (اسلام و همکاران، 2011).
براساس شواهد باستان شناسی قدمت کشت نخل خرما در ایران بیش از هفت هزار سال پیش میرسد که از بینالنهرین منشاء گرفته است (وریگلی[11]، 1995). تعداد کل درختان نخل در جهان 105 میلیون و مساحتی حدود 800 هزار هکتار را میپوشاند (جین[12]، 2007). در حال حاضر خرما در پنج قاره دنیا و در بیش از ۳۴ کشور کشت و مورد بهرهبرداری قرار میگیرد. بیش از نیمی از خاک کشور ایران مستعد کشت و پرورش خرما میباشد. در حال حاضر، 21 درصد خرمای جهان از ایران تأمین میشود. در سال 1388، ایران با حدود 253 هزار هکتار سطح زیر کشت و با تولیدی بالغ بر 105400 تن، از بزرگترین تولیدکنندگان خرما در دنیا بوده است و از نظر سطح زیر کشت بعد از امارات متحده عربی و از نظر تولید بعد از کشور مصر در رتبه دوم جهانی قرار داشت (فاو، 2009) که از این سطح 84 درصد را درختان بارور و 16 درصد را درختان غیر بارور یا نهال تشکیل میدهند.
2-1 بیان مسأله
خرما گیاهیست دوپایه که پایههای نر و ماده آن به صورت مجزا هستند. اما تا زمان گلدهی از همدیگر قابل تفکیک نیستند. نخل خرمای ماده پس از 5-3 سال به ثمر مینشیند و به طور کامل در 12 سالگی بالغ میشوند (جین، 2006). تکثیر خرما از طریق جنسی[13] و رویشی[14] است که تکثیر رویشی از طریق پاجوش[15] و تکثیر جنسی آن از طریق بذر صورت میگیرد. در گیاهان تکثیر شده از طریق رویشی بیماریهای متعددی از قبیل بیماریهای باکتریایی، قارچی، ویروسی و مایکوپلاسمایی تجمع یافته که باعث کاهش بهرهوری میگردد. معمولاً برای تکثیر خرما پاجوشهای ریشهدار شده ترجیح داده میشوند زیرا آنها تولید درختان با کیفیت مشابه با درختان مادری خود میکنند (الخیری[16]، 2001). به این که هر درخت تعداد بسیار کمی پاجوش در طول زندگی خود تولید می کند (3-8 عدد) و برخی از ژنوتیپها پاجوش تولید نکرده و پاجوشها مشکلاتی از قبیل عدم وجود ریشه را خواهند داشت (پوپنو[17]، 1973)، تولید از طریق پاجوش محدود بوده و مقرون بهصرفه نمیباشد. تکثیر از طریق بذر نیز دارای محدودیتهایی از قبیل سرعت کم جوانهزنی، تنوع در نتاج تولیدی و نیاز به چندین سال برای رسیدن به مرحله باردهی و عدم تمایز درختان نر و ماده از هم تقریباً تا 5 سال بعد از کشت میباشد (چند و همکاران[18]، 2004).
برای غلبه بر مشکلات تکثیری، حل مشکلات مربوط به هیبریداسیون و برای حفظ ژرم پلاسم، ریزازدیادی در شرایط آزمایشگاهی[19] (جنینزایی سوماتیکی یا اندامزایی) یک روش موفقیتآمیز است که تکثیر سریع جهت تولید تجاری ارقام برگزیده، تکثیر گیاهان با کیفیت بالا و یکسان از لحاظ ژنتیکی، تکثیر در مقیاس وسیع، ذخیره سازی طولانی مدت (انجماد[20])، بستهبندی، صادرات آسان و سریع، دستکاری ژنتیکی، کاهش مدت زمان تولید نهال، تولید خارج از فصل و گیاهچههای عاری از آلودگی را فراهم میآورد (ایک و همکاران[21]، 2005). جنینهای سوماتیکی میتوانند به طور غیرمستقیم از طریق کالوس یا به طور مستقیم و بدون دخالت کالوس تشکیل شوند. گیاهچههای حاصل از کالوس گاهی اوقات تفاوتهای ژنتیکی یا اپیژنتیکی مختلف نسبت به کلون والدینی خود نشان میدهند بهویژه زمانی که دوره واکشت طولانی گردد در نتیجه کالوس غیریکنواخت حاصل میگردد (کنیتا و کوثری[22]، 2002). همچنین برخی از هورمونها در محیط کشت مانند 2,4-D ماهیتاً جهشزا هستند (حمید و همکاران[23]، 2009). جهش رخ داده در طی کالوسزایی که سبب ایجاد تنوع سوماتیکی در گیاهچهها گردیده بهویژه زمانی که تنوع ایجاد شده سبب ایجاد صفاتی مانند تحمل به تنشهای زنده و غیر زنده، کیفیت بالاتر از کلونهای مادری و دیگر صفات زراعی باشد، میتواند مفید واقع گردد (الحفرمی[24]، 2009)، همچنین زمانی که تولید زیاد گیاهچه مد نظر است جنینزایی غیرمستقیم کاربرد دارد. جنینزایی سوماتیکی به واسطه مرحله کالوسزایی در آزمایشگاههای تحقیقاتی بسیار کارآمد و محبوب است.زیرا گیاهچههای کشت بافتی که از طریق کالوس تولید میشود پتانسیل جنینزایی نابجا را دارا هستند. این جنینهای سوماتیکی را میتوان با پوشش مناسب به عنوان بذور مصنوعی بهکار برد (بابخیت، 2005). تکنیکهای موجود تکثیر سریع خرما به افزایش تقاضا برای میوه خرما در سراسر جهان کمک کرده است (جین، 2011).
3-1 ضرورت و اهمیت موضوع
در جنینزایی سوماتیکی انتخاب منبع ریزنمونه حساسترین تصمیم بوده است، لذا از منابع مختلف گزارشهای متعددی منتشر شده است. تلاشهای اولیه از طریق رویانهای تخم (شروئیدر[25]، 1970) بوده و بعدها ریزنمونههایی از قبیل رأس ساقه، برگهای اولیه، جوانهی جانبی، برگهای جوان و گل آذین مورد بررسی قرار گرفته است. در بسیاری از آزمایشگاههای تجاری، نخل خرما با جنینزایی از ریزنمونه رأس ساقه تولید میگردد که استفاده از این ریزنمونه و استفاده از محیطهای با اکسین بالا باعث بسیاری از مشکلات تکنیکی از جمله آلودگیهای درونزای باکتریایی، قهوهای شدن، تنوع سوماکلونال و مدت زمان طولانی جهت تولید (حدود 3 سال) شده است و این در صورتی انجامپذیر است که پروتکل شناخته شدهای وجود داشته باشد ( ابول سعود[26] و همکاران، 2004). بنابراین ریزنمونههای جایگزین مناسب برای غلبه بر مشکلات ذکر شده در بالا مورد نیاز است. به عنوان مثال در آلودگیهای باکتریایی میانبافتی میتوان از ریزنمونههای جوان یا ریزنمونههای بافت آوندی نابالغ استفاده کرد (افکای[27]، 2005). همچنین استفاده از گل نر و بلاخص بساکها به دلیل هاپلوئید بودن آنها و آلودگی کمتر مورد توجه قرار گرفته است. با این حال، نرزایی در گونههای چوبی[28] تنها در تعداد معدودی موفقیتآمیز بوده است (پیکسا و همکاران[29]، 2004). تاکنون نرزایی در نخل خرما گزارش نگردیده است و تنها مطالعات کمی بر روی کشت بساک نارگیل انجام گرفته است. از دیگر موارد، کشت جنین است که شامل برداشت جنین استریل از بذر و کاشت آن در یک محیط غذایی استریل است. کشت جنین برای نجات جنین و یا رشد جنین از هیبریداسیون بینگونهای[30] (جانستون و استرن[31]، 1957) و کاهش دوره خواب[32] طولانی مورد استفاده قرار میگیرد (هودد[33]، 1977). رابشلت و گس[34]، 1974 ریزنمونههایی از جنین خرما را در شرایط درون شیشهای کشت دادند، میوه سبز نخل خرما، دو تا سه ماه بعد از گرده افشانی برداشت شده و در یک محیط غنی شده با 2,4-D کاشته شد، و پس از آن کالوس گرهدار کرم رنگ بهدست آمد.
4-1 اهداف تحقیق
1- تعیین تأثیر تنظیمکنندههای رشد گیاهی[35] مختلف بر جنینزایی سوماتیکی در خرما
2- بررسی اثر نوع ریزنمونه بر جنینزایی سوماتیکی در خرما
3- بررسی امکان نرزایی در نخل خرما
فصل دوم
مروری بر پیشینه موضوع
فصل دوم مروری بر پیشینه موضوع
1-2 منشأ و تاریخچه نخل خرما
نخل خرما با نام علمی (Phoenix dactylifera L.)، احتمالاً یک واژه فنیقی[36] است. واژه “Phoenix” از یک پرندهی اسطورهای یونان باستان بهنام سیمرغ گرفته شده که زائیدهی آتش است و dactylifera از واژهی یونانی “daktulos” به معنای یک انگشت است که بیانگر شکل میوه خرماست (لینه[37]، 1734).
نخل خرما در لوحهای آشوریان و بابلیها به تصویر کشیده است، ازجمله لوح مشهور حمورابی، که شامل قوانین مربوط به کشت و فروش نخل خرماست. منابع مربوط به نخل خرما نیز در نوشتههای مصر باستان، سوریه، لیبی و فلسطین یافت میشود (پوپنو، 1973). از آنجایی که سابقه طولانی مدت در کشت و توزیع گسترده و صادرات نخل خرما وجود دارد، منشاء دقیق نخل خرما ناشناخته است، اما به احتمال زیاد از منطقه بینالنهرین و یا غرب هند سرچشمه گرفته است (وریگلی، 1995). مدارک بیشتر از قدمت زیاد درختان خرما در دره نیل مصر خبر میدهد که از آن به عنوان نمادی برای سال در هیروگلیف مصری و برگ ساقه آن به عنوان یک نماد برای ماه استفاده شده است (داوسن[38]، 1982).
2-2 گسترش جغرافیایی نخل خرما در جهان
نخل خرما متعلق به خانواده پالمئاسه[39] است که حدود 200 جنس و 2500 گونه را داراست (داوسن، 1982). بر اساس گزارش درانسفیلد و اول[40] (1986) نخل خرما به شرح زیر طبقهبندی شده است: گروه: اسپادیسیفلورا[41]، راسته: پالمئا[42]، خانواده: پالمئاسه،[43]، زیر خانواده: کوریفوئیده[44]، قبیله: فونیسه[45]، جنس: فونیکس، گونه: داکتیلیفرا. فونیکس دارای 12 گونه است که اکثراً به عنوان درخت زینتی شناخته شده و دارای ارزش تجاری بسیاری هستند از جمله P. canariensis Chabeaud که معمولاً به نام نخل جزیره قناری نامیده میشود. همچنین P. sylvestris Roxb به طور گستردهای در هند به عنوان یک منبع قندی استفاده میشود.
[1] . Date palm
[2] . Perennial
[3] . Monocotyledon
[4] . Dioecious
[5] . Out-cross
[6] . Evergreen
[7] . Arecaceae
[8] . Aslam et al.
[9] . Fao
[10] . Bakheet et al.
[11] . Wrigley
[12] . Jain
[13] . Sexual
[14] . Vegetative
[15] . Offshoot
[16] . Al-Khayri
[17] . Popenoe
[18] . Chand et al
[19] . In vitro
[20] . Cryopreservation
[21] . Eke et al
[22] . Kanita and Kothari
[23] . Hameed et al
[24] . El Hadrami
[25] . Schroeder
[26] . Abul-Soad
[27] . Fki
[28] . Woody species
[29] . Peixe et al
[30] . Interspecific hybridisation
[31] . Johnston and Stern
[32] . Dormancy
[33] . Hoded
[34] . Rabéchault and Gas
[35] . Plant growth regulators (PGR)
[36] . Phoenician
[37] . Linne
[38] . Dowson
[39] . Palmaceae
[40] . Dransfield and Uhl
[41] . Spadiciflora
[43] . Palmaceae
[44] . Coryphyoideae
[45] .Phoeniceae
ممکن است هنگام انتقال از فایل اصلی به داخل سایت بعضی متون به هم بریزد یا بعضی نمادها و اشکال درج نشود ولی در فایل دانلودی همه چیز مرتب و کامل و با فرمت ورد موجود است
متن کامل را می توانید دانلود نمائید
چون فقط تکه هایی از متن پایان نامه در این صفحه درج شده (به طور نمونه)
ولی در فایل دانلودی متن کامل پایان نامه
با فرمت ورد word که قابل ویرایش و کپی کردن می باشند
موجود است
تعداد صفحه :141
قیمت : 14700 تومان
—-
پشتیبانی سایت : * parsavahedi.t@gmail.com
14,700 تومانافزودن به سبد خرید