(در فایل دانلودی نام نویسنده موجود است)
تکه هایی از متن پایان نامه به عنوان نمونه :
(ممکن است هنگام انتقال از فایل اصلی به داخل سایت بعضی متون به هم بریزد یا بعضی نمادها و اشکال درج نشود ولی در فایل دانلودی همه چیز مرتب و کامل است)
فهرست مطالب:
فصل اول
1-1- مقدمه و هدف…………………………………. 2
1-2-کلیات………………………………………… 3
1-2-1- نقش آب در اعمال گیاهان………………………. 3
1-2-2- تنش……………………………………….. 4
1-2-3- تنش خشکی…………………………………… 5
1-2-4- جنگلهای زاگرس………………………………. 6
1-2-5- بلوط………………………………………. 8
1-2-6- اثر تنش خشکی بر خصوصیات مورفولوژیکی درختان…….. 9
1-2-6-1- تعداد برگ……………………………….. 10
1-2-6-2- رشد ریشه و ساقه………………………….. 11
1-2-6-3- بیوماس………………………………….. 12
1-2-7- پارامترهای فیزیولوژیک و تاثیر تنش خشکی بر روی آنها 12
1-2-7-1- محتوای نسبی آب…………………………… 13
1-2-7-2- عملکرد فتوسیستم ∏………………………… 14
1-2-7-3- نرخ نشت الکترولیت………………………… 14
1-2-7-4- تبادلات گازی……………………………… 15
1-2-7-5- فتوسنتز…………………………………. 16
1-2-7-6- تعرق……………………………………. 16
1-2-7-7- هدایت روزنهای……………………………. 17
1-2-7-8- عناصر غذایی……………………………… 17
1-2-7-8-1- نقش فسفر………………………………. 18
1-2-7-8-2- نقش پتاسیم…………………………….. 18
1-2-7-8-3- نقش سدیم………………………………. 19
1-2-7-8-4- نسبت سدیم به پتاسیم………………… 20
1-2-8- نشانگر مولکولی…………………………….. 20
1-2-8-1- نشانگر مولکولیAFLP……………………….. 23
1-2-9- واکنش زنجیرهای پلیمراز PCR)) ………………… 25
1-2-10- بیان ژن………………………………….. 26
1-2-10-1- مراحل مختلف بیان ژن……………………… 27
1-2-11- واکنش نسخهبرداری معکوس (RT)………………… 28
1-2-11-1- PCR همراه با نسخهبرداری معکوس (RT-PCR………. 28
فصل دوم: مروری بر مطالعات انجام شده
2-1- ویژگیهای مورفولوژیک و رویشی…………………… 30
2-2- ویژگیهای فیزیولوژیکی…………………………. 31
2-2-1- محتوای نسبی آب…………………………….. 31
2-2-2- عملکرد فتوسیستم ∏………………………….. 32
2-2-3- نشت الکترولیت……………………………… 34
2-2-4- فتوسنتز و هدایت روزنهای…………………….. 34
2-3- جذب عناصر…………………………………… 35
2-4- شناسایی ژنهای مرتبط به خشکی با بهره گرفتن از cDNA- AFLP. 36
فصل سوم: مواد و روشها
3-1- نحوه جمع آوری و کاشت بذر گونه های مورد مطالعه……. 40
3-2- روش اعمال تنش کمبود آب و برداشت نهالها…………. 40
3-3- اندازه گیری پارامترهای مورفولوژیکی و رویشی……… 41
3-4- اندازه گیری پارامترهای فیزیولوژیک………………. 42
3-4-1- اندازه گیری محتوای نسبی آب…………………… 42
3-4-2- اندازه گیری عملکرد فتوسیستم ∏……………….. 42
3-4-3- اندازه گیری نرخ نشت الکترولیت………………… 42
3-4-4- اندازه گیری تبادلات گازی……………………… 44
3-4- 5- اندازه گیری سدیم و پتاسیم قابل جذب توسط گیاه….. 44
3- 5- مطالعات مولکولی…………………………….. 46
3- 5- 1- استخراج RNA……………………………… 46
3- 5-2- تهیه ژل آگارز- (یک درصد)…………………… 47
3-5-3- تهیه loding day………………………………. 47
3- 5-4- تهیه MOPS [1X] (محلول تانک)………………… 48
3- 6- تجزیه و تحلیل داده ها………………………… 48
3-6-1- اندازه گیری شاخص تحمل (STI)…………………… 49
فصل چهارم: نتایج و بحث
4-1- نتایج وبحث پارامترهای رویشی…………………… 50
4-2- نتایج و بحث پارامترهای فیزیولوژیک……………… 53
4-3- نتایج و بحث جذب عنصر…………………………. 55
4-4- نتایج و بحث شاخص تحمل………………………… 59
4-5- نتایج و بحث فتوسنتز……………………….. .. 60
4-6- نتایج و بحث همبستگی تبادلات گازی……………….. 63
4-7- نتیجه گیری کلی و پیشنهادات…………………….. 67
4-7-1- نتیجه گیری کلی……………………………… 68
4-7-2- پیشنهادات…………………………………. 69
منابع و مآخذ…………………………………….. 70
پیوست…………………………………………… 87
فهرست جدولها
جدول 1-1- مهمترین نشانگرهای dna با مزایا و محاسن آنها… 23
جدول 4-1- نتایج تجزیه واریانس (میانگین مربعات) صفات رویشی و مورفولوژیک مورد بررسی……………………………………………….. 51
جدول 4-2- مقایسه میانگین صفات رویشی و مرفولوژیک مورد بررسی در دو گونه مورد مطالعه……………………………………………….. 51
جدول4-3- مقایسه میانگین صفات رویشی و مرفولوژیک مورد بررسی در تیمارهای آبی مختلف 52
جدول4-4- نتایج تجزیه واریانس (میانگین مربعات) صفات فیزیولوژیکی مورد مطالعه 53
جدول4-5- مقایسه میانگین صفات فیزیولوژیکی در دو گونه مورد مطالعه 53
جدول4-6- مقایسه میانگین صفات فیزیولوژیکی در تیمارهای آبی مختلف 54
جدول4-7- نتایج تجزیه واریانس(مقایسه میانگین) جذب عنصر… 58
جدول4-8- مقایسه میانگین جذب عنصر در دو گونه مورد مطالعه. 56
جدول4-9- مقایسه میانگین جذب عنصردرتیمارهای آبی مختلف…. 56
جدول4-10- شاخص تحمل به تنش (STI) در دو گونه مورد مطالعه.. 59
جدول4-11- نتایج تجزیه واریانس (میانگین مربعات) صفات مورد مطالعه………………………………………………………………………61
جدول 4-12- مقایسه میانگین صفات مورد بررسی در دو گونه مورد مطالعه…………………………………………………………………..61
جدول 4-13- مقایسه میانگین صفات مورد بررسی در زمانهای مختلف…………………………………………………………………………62
جدول 4-14- مقایسه میانگین صفات مورد بررسی در تیمارهای آبی مختلف………………………………………………………………….62
جدول 4- 15- نتایج همبستگی پارامترهای تبادلات گازی در گونه ویول………………………………………………………………………63
جدول 4-16- نتایج همبستگی پارامترهای تبادلات گازی در گونه بلوط ایرانی……………………………………………………………….64
فهرست شکلها
شکل1-1- واکنش زنجیرهای پلیمراز…………………….. 26
شکل 1-2- رونویسی…………………………………. 27
شکل1-3- پردازش…………………………………… 27
شکل 1-4- ترجمه…………………………………… 28
شکل 1-5- نسخه برداری معکوس………………………… 29
شکل 4-1- بر همکنش گونه و تنش خشکی برای صفت پتاسم برگ…. 57
شکل4-2- بر همکنش گونه و تنش خشکی برای صفت سدیم برگ…… 57
شکل4-3- بر همکنش گونه و تنش خشکی برای صفت سدیم ریشه….. 58
شکل 4-4- بر همکنش گونه و تنش خشکی برای صفت نسبت سدیم به پتاسیم برگ 58
شکل 4-5- بر همکنش گونه و تنش خشکی برای صفت نسبت سدیم به پتاسیم ساقه 58
شکل4-6- تصویر ژل بارگذاری شده…………
چکیده
جنگلهای زاگرس حدود40 درصد از کل جنگلهای ایران را به خود اختصاص داده اند و بیشترین تأثیر را در تأمین آب، حفظ خاک، تعدیل آب و هوا و تعادل اقتصادی– اجتماعی در کل کشور دارند. این جنگلها به علت دارا بودن اقلیم مدیترانهای دارای فصل خشک طولانی در طی دوره رویش گیاهی در طول سال بوده، و مقدار آب در دسترس در این جنگلها یک فاکتور محدود کنندهی اولیه در تجدید حیات گونه های این مناطق میباشد. تنشهای غیر زیستی مانند خشکسالی پدیده های مهمی هستند و بر روی سلامت، بهره وری و تناسب جنگلهای ما اثر گذار میباشند، بنابراین نیازمند به درک ژنومی و اکوفیزیولوژیکی پاسخ درختان جنگلی به تغییر شرایط آب و هوایی میباشد. با بهره گرفتن از مطالعات مورفولوژیکی، فیزیولوژیکی و مولکولی، میتوانیم روشهای اصلاحی مختلفی که برای مقاومت به خشکی وجود دارند را شناسایی کنیم. در این آزمایش، بذور سه گونه بلوط مورد مطالعه (Q. brantii، Q.libania و Q.infectoria) در داخل گلدان پلاستیکی در فضای آزاد کاشته شدند (هرگلدان حاوی 2-1 بذر). نهالهای گونه Q.infectoria به علت سبز نشدن در این آزمایش لحاظ نگردید. جهت اعمال تنش نهالها به فضای گلخانه منتقل شدند و نهالهای سالم از هر گونه به 4 دسته تیمار کنترل و تنش کمبود آب در سه سطح تقسیم شدند. نهالهای در نظر گرفته شده برای تنش کمبود آب آبیاری نشدند تا به ظرفیت مزرعهای مورد نظر (70٪، 50٪ و 30٪ ظرفیت مزرعهای) رسیدند، ولی نهالهای کنترل هر روز آبیاری گردیدند تا محتوی آب خاک گلدانها در حدود 100٪ ظرفیت مزرعهای نگه داشته شود. پس از برداشت نهالها، پارامترهای رویشی و مورفولوژی (ارتفاع نهال، طول ریشه، وزن برگ و ساقه و ریشه، تعداد کل برگ، نسبت برگ سبز به کل برگ، بیوماس، نسبت ریشه به ساقه، وزن خشک برگ، ریشه و ساقه) و پارامترهای فیزیولوژی (محتوی نسبی آب برگ و ساقه و ریشه (RWC)، نرخ نشت الکترولیت (EL)، عملکرد فتوسیستم II و تبادلات گازی) اندازه گیری شدند و در نهایت استخراج RNA از نمونه های فریز شده برگ و ریشه انجام گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که تنش خشکی تاثیرات منفی بر پارامترهای رویشی، مورفولوژیکی و فیزیولوژیکی بلوط داشت، به طوری که اکثر پارامترهای رویشی و فیزیولوژیکی کاهش یافت اما نرخ نشت الکترولیت اندامها افزایش یافت. بر اساس نتایج بدست آمده از جذب عنصر تنش خشکی باعث افزایش میزان
پتاسیم در ریشه و ساقه گردید. همچنین نتایج نشان داد که میزان شاخص تحمل نیز در گونه بلوط ایرانی در تمام پارامترهای مورد مطالعه به جز وزن تر و خشک برگ بیشتر از گونه ویول میباشد. در این مطالعه گونه بلوط ایرانی نسبت به گونه ویول با جذب سدیم کمتر برگ و در نتیجه نسبت سدیم به پتاسیم کمتر و نیز کاهش تعداد برگ توانست تحمل بهتری را از خود نشان دهد. پارامترهای مربوط به تبادلات گازی نشان داد که تیمار تنش کمبود آب سبب کاهش معنیداری در هدایت روزنهای، فتوسنتز، هدایت مزوفیلی و دیاکسیدکربن زیر روزنهای به محیطی و تعرق شد. همچنین گونه ویول فتوسنتز، کارایی مصرف آب و تعرق بیشتری نسبت به بلوط ایرانی داشت. به طور کلی میتوان نتیجه گیری کرد که در هر دو گونه محدودیت روزنهای و غیر روزنهای باعث کاهش فتوسنتز گردید. همچنین گونه بلوط ایرانی به دلیل داشتن کارایی مصرف آب کمتر و کاهش بیشتر درصد تغییرات پارامترهای گازی نسبت به گونه ویول از مکانیسم اجتناب از خشکی در زمان تنش بهره میجوید. اما در مورد مطالعات مولکولی عمل استخراج RNA صورت گرفت مرحله run کردن نمونه نیز انجام شد ولی در مرحله الکتروفورز به علت مشاهده نشدن نوارهای مربوط بهRNA مطالعات مولکولی موفقیتآمیز نبود.
1-1- مقدمه و هدف
جنگلهای زاگرس از گسترده ترین اکوسیستمهای جنگلی در حال تخریب در ایران میباشند و دومین اكوسیستم طبیعی بعد از جنگلهای شمال محسوب میشوند که از لحاظ حفاظت آب و خاک و مسائل اقتصادی، اجتماعی اهمیت بالایی دارد (حسینی و همکاران، 1387). بنابراین احیاء و غنیسازی این جنگلها با گونه های مختلف جنس بلوط که مهمترین جنس تشکیل دهنده آن است، ضروری میباشد (ذوالفقاری، 1387). اما جنگلهای زاگرس به دلیل داشتن اقلیم مدیترانهای، دارای فصل خشک طولانی در طی دوره رویش گیاهی و پراکنش نامنظم بارندگی در طول سال هستند و در نتیجه مقدار آب در دسترس این جنگلها به عنوان یک فاکتور محدود کننده اولیه در تجدید حیات گونه ها به ویژه بلوط محسوب می شود. طبق نظر محققین جنگلهای بلوط غرب در زمره جنگلهای خشکیگرا هستند. سه گونه بلوط در کل زاگرس وجود دارد که هر 3 گونه بومی ایران میباشند و مورد قبول اکثر گیاه شناسان ایران است. این گونه ها شاملQuercus infectoria و Quercus libania و Quercus brantii میباشند (جزیرهای و ابراهیمی، 1382).
بر اساس مناطق رویشی، رویشگاه گونه های مختلف زاگرس را به دو بخش متمایز تحت عنوان زاگرس شمالی و زاگرس جنوبی تقسیم نموده اند. زاگرس شمالی رویشگاه ویژهQuercus libani Olivier است كه البته در قسمت هایی از این حوزه با Q. infectoria Olivier یاLindl Q. brantii یا با هر دو مخلوط میگردد. اما زاگرس جنوبی که دارای اقلیم خشکتری نسبت به زاگرس شمالی است، رویشگاه ویژه گونه Q. brantii است (جزیرهای و ابراهیمی، 1382).
تنشهای غیر زیستی مانند خشکسالی پدیده های مهمی هستند و بر روی سلامت، بهره وری و تناسب جنگلهای ما اثر گذار میباشند، بنابراین نیازمند به درک ژنومی و اکوفیزیولوژیکی پاسخ درختان جنگلی به تغییر شرایط آب و هوایی میباشد (راجورا و همکاران[1]، 2011). کمبود آب، یک مشکل جهانی رو به افزایش است. کمبود آب تولید بسیاری از اکوسیستمهای طبیعی را مخصوصاً در اقلیمهای خشک محدود می کند. به علاوه تنش آبی به عنوان مهمترین تنش غیرزیستی نقش مهمی در کاهش تنوع ژنتیکی و عملکرد گیاهان در جهان دارد (كوچكی و همكاران،1384). هر چند جنگلهای غرب ایران از نظر وسعت بیشترین سطح جنگلهای کشور را داراست، اما از نظر اقتصادی (تولید چوب) بعد از جنگلهای شمال کشور قرار دارد و نقش اصلی این جنگلها حفاظت از آب و خاک است که نباید نادیده گرفته شود. بنابراین به منظور احیاء جنگلهای غرب کشور به ناچار باید از گونههای سازگار و بومی جنگلهای زاگرس استفاده گردد (فتاحی،1378).
بارتلس و سانکار[2] (2005) بیان کردند که خشکی علاوه بر ایجاد تغییرات بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی، در سطح مولکولی نیز تغییراتی را به وجود می آورد. تا امروزه مطالعات کمی در زمینه تنشهای محیطی بر روی درختان جنگلی صورت گرفته که هدف اصلی آنها شناسایی و ایجاد واریتههایی است که بتوانند به خوبی در برابر تنشها از خود مقاومت نشان داده و محصول بیشتری تولید نمایند. از اینرو استفاده از فنهای جدید جهت انجام مطالعه بر روی تنشهای محیطی امری اجتناب ناپذیر بوده و از لحاظ اقتصادی نیز قابل توجیه است (خویدکی، 1389). با بهره گرفتن از مطالعات مورفولوژیکی، فیزیولوژیکی و مولکولی، میتوانیم روشهای اصلاحی مختلفی که برای مقاومت به خشکی وجود دارند را شناسایی کنیم (نوروزی، 1383).
بررسیها نشان داده که زادآوری طبیعی جنس بلوط اغلب با مشکلاتی مواجه است (تادانی[3] و همکاران، 1995) و کیفیت پایین نهالهای بلوط نیز جنگلکاری با این گونه را با مشکل روبرو کرده است (کلارک[4]و همکاران،2000)، بنابراین مطالعه خصوصیات مورفولوژیکی و رویشی (ریچ [5]و همکاران، 1992) و همچنین مشخصات فیزیولوژیک (جذب و انتقال و فتوسنتز) روی مقاومت گیاه در برابر خشکی دارای اهمیت بسیار میباشد و بر این اساس است که اختلاف در استراتژی مقاومت به خشکی در گیاهان در گونه ها یا اکوتیپهای مختلف وجود دارد (لویا و فرناندزالس[6] ، 1998).
امروزه روشهایی استفاده می شود که میتوانند اظهار متفاوت ژنها را در بین نمونه های آزمایشی شناسایی کنند. یکی از بهترین این روشها cDNA-AFLP میباشد که این روش به دلیل تکرارپذیری و حساسیت بالا، به وفور مورد استفاده قرار میگیرد (باچم[7] و همکاران، 1996). روشcDNA – AFLP به ما اجازه میدهد تا اظهار متفاوت از رونوشتها را با بهره گرفتن از PCR تشخیص دهیم.
با توجه به مطالب گفته شده در بالا و اهمیت روز افزون خشکی و تخریب جنگلهای زاگرس و عدم موفقیت در جنگلکاریها، تحقیق حاضر در نظر دارد به بررسی و مطالعه پاسخهای مرفولوژیکی، فیزیولوژیکی و ژنتیکی با بهره گرفتن از نشانگر مولکولی cDNA-AFLP، نهالهای سه گونه بلوط ایرانی، دارمازو و ویول نسبت به تنش خشکی به منظور شناخت عکس العملهای گونه های مختلف بلوط با تنش کمبود آب، بپردازد.
سوالات اصلی این پژوهش به شرح ذیل میباشد:
- آیا تنش خشکی باعث ایجاد تفاوت الگوهای باندی اظهار شده cDNA-AFLP در سه گونه بلوط زاگرس، نسبت به کنترل می شود؟
- آیا شدت تنش خشکی یا تیمارهای آبی مختلف در بروز الگوهای باندی و نوع الگوهای موثر است؟
- آیا بافتهای ریشه و برگ از نظر نوع الگوهای باندی در واکنش به خشکی متفاوت هستند؟
- آیا گونه های مختلف بلوط زاگرس از نظر پاسخ به پارامترهای مورفولوژیکی، فیزیولوژیکی و جذب عناصر با هم تفاوت دارند؟
هدفهای این پژوهش نیز با توجه به سوالات مطرح شده در بالا به صورت زیر میباشد:
- تعیین تفاوتهای موجود در الگوهای باندی گونه های مختلف بلوط با بهره گرفتن از cDNA-AFLP در حالت تنش خشکی نسبت به کنترل برای شناسایی باندهای Informative در هر گونه به طور جداگانه.
- مقایسه الگوهای باندی بیان شده هر یک از بافتهای ریشه و برگ.
- مقایسه پاسخهای مورفولوژیکی، فیزیولوژیکی و جذب عناصر در سه گونه بلوط زاگرس و شناسایی مقاومترین گونه بر اساس پارامترهای مورد مطالعه.
تعداد صفحه : 107
قیمت :14700 تومان
بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد
و در ضمن فایل خریداری شده به ایمیل شما ارسال می شود.
پشتیبانی سایت : * parsavahedi.t@gmail.com
در صورتی که مشکلی با پرداخت آنلاین دارید می توانید مبلغ مورد نظر برای هر فایل را کارت به کارت کرده و فایل درخواستی و اطلاعات واریز را به ایمیل ما ارسال کنید تا فایل را از طریق ایمیل دریافت کنید.
14,700 تومانافزودن به سبد خرید